​
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
Ophiogenin-3-O-alpha-L-rhaMpyrasyl-(1→2)-beta-D-glucopyraside1,2-二氯乙烷  for HPLC, ≥99.9%5-氨基-3-甲基异噻唑 盐酸盐 97%

Ophiopogonin A乙酸乙酯 农残级2-乙酰基苯并噻吩 98%

Ophiopogonin B氟罗里硅土 农残级2-氨基-4-并噻唑 98%

Ophiopogonin C正庚烷 农残级, ≥99%(GC)N-叔丁基-十氢异喹啉-3(S)-甲酰胺 97%

Ophiopogonin D’正庚烷 for HPLC, ≥99%(GC)4-溴甲基喹啉-2-酮 97%

Ophiopogonin D异辛烷 for HPLC,>99% (GC)4-溴-2,6-二氟苯甲酸 98%

Parisaponin I异辛烷 ACS, ≥99.0%(R)-(+)-2-溴-alpha-甲 98%

Parisyunnaside B异丁  for HPLC, ≥99.5%(GC)3-溴喹啉 98%

Pengenin正  for HPLC, ≥99.9%1-Boc-3-氧哌 98%

Periplocin正 分析标准品N-Boc-异六氢烟碱酸 99%

Periplogenin正 农残级科里内酯 98%

Polyphyllin B正戊烷 农残级5-氯-1,3,3-*基-2-亚甲基吲哚啉 90%

Polyphyllin C正戊烷 for HPLC, ≥99.0%1-(2-氯基-5-磺酸苯基)-3-甲基-5-吡唑酮（25CSMP）  97%

Polyphyllin II1-癸烷磺酸钠 for Ion pair chromatography，≥98.0%盐酸西替利 98%

Polyphyllin VI1-癸烷磺酸钠 98%5-氯氧化吲哚 98%

Polyphyllin G1-癸烷磺酸钠 for Ion pair chromatography，≥99.0%2-(二环己基膦基)联苯 98%

三（TFA）(色谱级)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (19A10) Rabbit mAbphospho-CDK6 (Tyr13)  磷酸化周期素依赖性激酶6抗体

四乙基氢氧化铵(10%的溶液)[离子对色谱级]Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (19A10) Rabbit mAbphospho-CDK5(Tyr15)  磷酸化周期素依赖性激酶5抗体

四丁基氢氧化铵(10%的溶液)[离子对色谱级]Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (19A10) Rabbit mAbPhospho-CDK2 (Thr160)  磷酸化周期素依赖性激酶2抗体

四正丁基溴化铵[离子对色谱级]POLR1A (D6S6S) Rabbit mAbPhospho-CDK2 (Thr14)  磷酸化周期素依赖性激酶2抗体

四正丁基氯化铵[离子对色谱级]VEGF Receptor 2 (55B11) Rabbit mAbphospho-CDH2 (Tyr820)  磷酸化N-钙粘附分子抗体

四丁基磷酸氢铵 (0.5mol/L的溶液)[离子对色谱级]VEGF Receptor 2 (55B11) Rabbit mAbphospho-Cdc6 (Ser54)  磷酸化细胞分裂周期蛋白6抗体

四丁基硫酸氢铵[离子对色谱级]eIF5 AntibodyPhospho-CDC42 (Ser71)  磷酸化细胞分化周期CDC42蛋白抗体

十二烷基*基氯化胺[离子对色谱级]Phospho-PLCbeta3 (Ser537) Antibodyphospho-CDC27/ANAPC3(Thr244)  磷酸化后期促进复合蛋白3抗体

乙酸二丁基铵(约0.5mol/L的溶液)[离子对色谱级]DLL3 (G93) Antibodyphospho-CDC27/ANAPC3(Ser427)  磷酸化后期促进复合蛋白3抗体

乙酸二基铵(约0.5mol/L的溶液)[离子对色谱级]DLL3 (G93) AntibodyPhospho-cdc25C (Thr48)  磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体
猪链球菌型PCR检测试剂盒厂家猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1公斤

猪纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：500克

猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃250毫克

猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT25克

猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：500毫克

猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：500ul*100支

猪血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃250毫克