注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
去甲异波尔定23599-69-1实验步骤Anti-MPS1/TTK研究领域  细胞生物 免疫学 发育生物学 神经生物学

补骨脂酚10309-37-2实验方法Anti-MOBKL2C研究领域  细胞生物 免疫学 表观遗传学

BOC-D-色氨酸保存Anti-MOBKL2B研究领域  细胞生物 免疫学 表观遗传学

Amberlite XAD7HP离子交换大孔吸附树脂价格Anti-Matriptase 2研究领域  细胞生物 免疫学 发育生物学

酸性橙12使用说明书Anti-MRP8+MRP14研究领域  细胞生物 免疫学 信号转导

莽草酸使用说明书Anti-MEGF5/Slit3研究领域  细胞生物 免疫学 发育生物学 内分泌病

链脲佐菌素溶液 ,10mg/mL10mL品牌Anti-MAML3研究领域  细胞生物 免疫学 发育生物学

小鼠白三烯E4（LTE4）elisa试剂盒Anti-MNAT1研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 发育生物学 信号转导 糖尿病

小鼠12羟二十烷四烯酸（12-HETE）elisa试剂盒Anti-MAPK13/SAPK4/p38delta研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 发育生物学 信号转导 糖尿病

人β细胞素（BTC）elisa试剂盒Anti-Multicilin研究领域  细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 表观遗传学

人β-防御素2 elisa试剂盒Anti-MTMR8研究领域  细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 表观遗传学

大鼠脉络膜血管细胞价格Anti-MYLIP/Idol研究领域  肿瘤 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶

Dulbecco磷酸盐缓冲液（DPBS）报价Anti-Mel18/ZNF144研究领域  细胞生物 免疫学

延胡索甲素518-69-4*Anti-MYF5研究领域  肿瘤 细胞生物 表观遗传学

D-松醇10284-63-6 实验步骤Anti-MICB研究领域  细胞生物 免疫学

雷公藤红素cath-B/CB(Cathepsin B)  组织蛋白酶B抗原YBX-1/YB1  核酸敏感元件结合蛋白1

雷公藤内酯甲cath-L/CL peptide  组织蛋白酶L抗原YB1  y-盒结合蛋白1抗体

木犀草素CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)  成骨特异性转录因子（多肽）YAP1  原癌基因Yes相关蛋白1抗体

木犀草苷CBP(CREB-binding protein)  CREB结合蛋白抗原XTP4  乙型肝炎病毒X蛋白反转录蛋白4抗体

没食子酸CBX3/HP1 gamma  染色盒同源物3抗原XRCC4  X射线修复交叉互补蛋白4抗体

蒙花苷CBX5(Chromobox Homolog 5)  CBX5（多肽）XRCC3  X射线修复交叉互补蛋白3抗体

标准品CC16(Clara cell protein 16) peptide  克拉拉细胞蛋白(Clara细胞分泌蛋白)抗原XRCC1  X射线修复交叉互补蛋白抗体

莽草酸CCR-2/5(CC chemokine receptor 2/5)  CC趋化因子受体2/5抗原XPC  DNA补充修复XPC细胞蛋白抗体

芹菜素CCL1/TCA3/I-309  嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原XPB/ERCC3  DNA损伤修复酶ERCC3蛋白抗体

青蒿素CCL5/RANTES(regulated on activation rmal T cell expressed and secreted)  活化T细胞表达和分泌的调节因子抗原XKR1  膜转运蛋白XK抗体
青蟹双顺反子病毒PCR检测试剂盒规格大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT5克

大鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT25克

大鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10克

大鼠组(HIS)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1克

大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：5克

大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1克
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。