注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
1,6-二磷酸果糖二钙盐价格Anti-PPP1R14A Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

海藻酸钙保存Anti-PPP1R1B Antibody研究领域  细胞生物 免疫学 线粒体

正磷酸〖铁〗二物使用说明书Anti-PPP2CA Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃葡糖酸苷保存Anti-PRAME Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

甜菊糖价格Anti-PPP3CA Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

羧化壳聚糖价格Anti-PPP2CA Antibody(原货号PB0362)研究领域  细胞生物 免疫学

甜菜碱盐酸盐保存Anti-PPT1 Antibody(原货号PB0831)研究领域  细胞生物 免疫学

7-羟基-4-甲基实验步骤Anti-PRDM1 Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

2-萘氧乙酸钠保存Anti-PRC1 Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

3-吲哚丁酸钾实验步骤Anti-PRDM5 Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

5-溴-2-脱氧尿苷实验步骤Anti-PRDX1 Antibody(原货号PB0348)研究领域  细胞生物 免疫学

无胆酸保存Anti-PRDX2 Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

脱氧鹅胆酸使用说明书Anti-PRDX3 Antibody研究领域  细胞生物 免疫学 信号转导 新陈代谢

乳酸菌选择性琼脂价格Anti-PRDX4 Antibody研究领域  细胞生物 免疫学

柠檬酸价格Anti-PRDX4 Antibody(原货号PB0416)研究领域  细胞生物 免疫学

流锰Manganese SulfateAR500g

DL004-25G2,4-dinitfluorobenzene 2，4-二硝基扶本 8-34-825g97

P8471-25GPectin 果胶9000-69-525g

TMB显色试剂盒(组化或膜HRP显色用)100ml

Niacinamide100g

铜粉Copper powder5N50g

硼酸Boric acid4N25g

流铵Ammonium sulfate4N10g

二甲亚砜Dimetxyl sulfoxide色固25ml

锌粒Zinc tablets5N25g

大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人新喋呤(NEOP)免疫试剂盒 Human neopterin,NEOP ELISA kit

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样

Ratmajorbasicprotein,MBPELISA试剂盒大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISA试剂盒人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanleukoregulin，LRELISAKit人白细胞调节素(LR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
麦芽香肉杆菌PCR检测试剂盒规格人抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒 英文名称：Human anti-centrol and centrosome antibody，ACA ELISA Kit进口/原装

人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA试剂盒英文名称：human anti-neutrophil cytoplasmic antibody,cANCA ELISA Kit进口/原装

人抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒英文名称：Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit进口/分装

人抗中性粒细胞抗体(ANA)ELISA试剂盒 英文名称：Human anti-neutrophil antibody,ANA ELISA Kit进口/原装

人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒英文名称：Human anti-neutrophil granules antibody，ANGA ELISA Kit*

人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA试剂盒英文名称：Human anti-trophoblast antibody,ATA ELISA Kit进口/原装
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。