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蜂房小甲虫PCR检测试剂盒厂家
参考价:

型号:50T

更新时间:2021-03-14  |  阅读:727

详情介绍

注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 蜂房小甲虫PCR检测试剂盒厂家

 英文名称

 Aethina tumidaPCR

 货号

 LZP6350

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。



实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
人白细胞抗原DR(HLA-DR)elisa试剂盒Anti-ATG7 Antibody研究领域 肿瘤 免疫学 结合蛋白 细胞类型标志物

人白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa试剂盒Anti-ATOH1 Antibody研究领域 肿瘤 心血管 免疫学 信号转导 激酶和磷酸酶

人白介素6受体(IL-6R)elisa试剂盒Anti-ATP11C Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 染色质和核信号 转录调节因子

人白介素37(IL-37)elisa试剂盒Anti-ATP1A2 Antibody研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 免疫学 信号转导 脂蛋白 新陈代谢

人白介素24(IL-24)elisa试剂盒Anti-ATM Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 转录调节因子 激酶和磷酸酶

β1肾上腺素能受体(β1AR)抗体elisa试剂盒Anti-ATP2A1 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 转录调节因子

β β胡萝卜素9' 10'加氧酶(BCO2)elisa试剂盒Anti-ATP2A3 Antibody研究领域 肿瘤 免疫学 信号转导 转录调节因子

α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)elisa试剂盒Anti-ATP2A1 Antibody研究领域 心血管 免疫学 神经生物学 转录调节因子

α-辅肌动蛋白4(ACTN-4)elisa试剂盒Anti-ATP2A2 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 染色质和核信号 信号转导 肿瘤细胞生物标志物 表观遗传学

α1抗胰蛋白酶(α1-AT)elisa试剂盒Anti-ATP4B Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 转录调节因子

Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)elisa试剂盒Anti-ATP2A2 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 干细胞 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 细胞分化

v-rel禽网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物B(RelB)elisa试剂盒Anti-ATP7A Antibody研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 免疫学 染色质和核信号 信号转导 干细胞 细胞周期蛋白 细胞分化 细胞类型标志物

UV切除修复蛋白RAD23 同源物A(RAD23A)elisa试剂盒Anti-ATP5MC1 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 转录调节因子

PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)elisa试剂盒Anti-ATRX Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 生长因子和激素

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa试剂盒Anti-ATP7B Antibody研究领域 肿瘤 免疫学 生长因子和激素 转录调节因子

EB增菌液冻干配套试剂SR0090支添加于225ml(0260成EB增菌液。

Mueller-Hinton 琼脂 (CM0337) Oxoid incubation media Mueller-Hinton 琼脂 (CM0337) Oxoid

绳状青霉 溶菌试验 /瓶

西蒙氏枸橼酸盐琼脂250g肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)

AgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)

MRS琼脂  MRSA  250克  食品中乳酸菌的培养

改良MRS琼脂培养基  MRS Lactotacillus Agar Modified  250克  乳酸菌的测定,双歧杆菌和嗜酸乳酸菌的计数

UBA培养基  UBA Medium  250克  啤酒中厌氧菌检测

NBB琼脂  NBB Agar  250克  啤酒中厌氧菌检测
蜂房小甲虫PCR检测试剂盒厂家Diethyl fumarate,98%通用试剂 25G

Diethyl phosphite,94%通用试剂 100ML

Triethyl phosphite,98%通用试剂 100ML

Ethyl gallate,96.0%通用试剂 25G

Titanium(IV) isopropoxide,97.0%通用试剂 100ML

Propylene carbonate,99%通用试剂 100G

Isobutyl chloroformate,98.0%通用试剂 25G

Furfuryl acetate,≥98%通用试剂 25G

Allyl chloroacetate,98%通用试剂 5ML

Isobutyl isobutyrate,≥98%通用试剂 25ML

Ethyl cyaacetate,≥98%通用试剂 100G

Ethyl p-toluenesulfonate,98%通用试剂 25G

Diallyl phthalate,97%通用试剂 100ML

Methyl Carbazate,97%通用试剂 25G

Benzyl carbazate,97%通用试剂 5G
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 

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