大鼠ELISA试剂盒试验时制备试剂与收集血样：

　　1.收集标本

　　血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作1：10稀释。

　　2.标准品液配制

　　使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成10ng/ml的溶液。设标准管8管，1管加标本稀释液900ul，2-8管加入标本稀释液500ul。在1管中加入10ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至2管。如此反复作对倍稀释，从第7管中吸出500ul弃去。第2管为空白对照。

　　3.10×标本稀释液用蒸馏水作1：10倍稀释（1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。

　　4.洗涤液：用重蒸水1：20稀释（1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）。

　　相关检测程序：

　　1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟；

　　2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干；

　　3.每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟；

　　4.洗板：同前；

　　5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟；

　　6.洗板：同前；

　　7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟；

　　8.每孔加入100ul终止液混匀；

　　9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。