染料法qPCR试剂盒因其试剂不乱、易保留,操纵简便,结果判定较客观等因素,已广泛用于免疫学检测的各领域中。然而,影响试验结果的因素良多,故加强各个环节的质量保证才能充分施展其方法学的长处。
染料法qPCR试剂盒在测定抗原时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既留存其免疫学活性,又留存酶的活性。
染料法qPCR试剂盒测抗原时的注意事项如下:
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用,在保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂盒的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。