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铜蓝蛋白(Cp)含量测试盒操作流程
更新时间:2025-01-22      阅读:86

铜蓝蛋白(Cp)含量测试盒操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

样品制备:

1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。

2). 过滤混浊溶液。

3). 除去样品中的CO 2 (过过滤)。

4 ). 过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。

6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。

7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。

9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10).含脂肪的样品用热水提取。


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