大鼠ELISA试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被雌激素(E)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最后的黄色。颜色的深浅和样品中的雌激素(E)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
大鼠ELISA试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶全溶解后再使用。试验中不用的板条应立刻放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白;依照说明书操作时样本已经稀释5倍,最结束果乘以5才是样本实际浓度。严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。全部液体组分使用前应充分摇匀。
大鼠ELISA试剂盒一般是可以通过酶标仪使用。酶标仪即酶联免疫检测仪,是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动两大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。